Información detallada Tesis (Metadatos y Resúmenes)

Título:
Evaluación de las apolipoproteínas A-I (ApoA-I) y sérica Amiloide A (A-SAA) como reactantes de fase aguda en Trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss)
Autor:
Villarroel Espíndola, Franz Dominick
Profesor Patrocinante:
Concha Grabinger, Margarita Inés
Grado a Optar:
Bioquímico - Licenciado en Bioquímica
Materia:
trucha arco iris; apolipoproteínas; respuesta inmune
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Bioquímica
Año de Aceptación:
2007
Resumen:
La respuesta de fase aguda es la inmediata reacción desarrollada por el organismo, destinada a contrarrestar los cambios producidos por daño tisular, trauma o invasión patógena. En mamíferos, las apolipoproteínas A-I (ApoA-I) y sérica amiloide A (A-SAA) son consideradas reactantes de fase aguda (RFA) negativa y positiva, respectivamente. Ello implica que su expresión hepática se modifica en respuesta a citoquinas pro-inflamatorias liberadas durante la fase aguda. Dado que A-SAA es una de las principales RFA en mamíferos y ha sido poco estudiada en peces, y puesto que, ApoA-I cumpliría un rol importante en la inmunidad innata de peces teleósteos; se evaluó su participación durante la respuesta de fase aguda en trucha arcoiris. Mediante RT-PCR se logró establecer que la expresión de a-saa se induce en barreras defensivas primarias, en tejidos como grasa y músculo esquelético y en órganos linfohematopoyéticos, en respuesta a un proceso inflamatorio o patológico, lo que sugiere una importante función inmune local para esta proteína. Sin embargo, por análisis de Western blot utilizando un antisuero contra un péptido de A-SAA de trucha producido y caracterizado durante esta tesis, no fue posible demostrar la presencia de A-SAA en el plasma de peces enfermos, pero si se logró inmunodetectar la proteína en cortes de músculo esquelético provenientes de un pez enfermo. Más aún, la marca para A-SAA se colocalizó con la tinción con tioflavina T, que específicamente detecta agregados de tipo amiloide. Por otra parte, no se detectó una variación significativa en los niveles de expresión hepática y concentración plasmática para ApoA-I en peces enfermos, lo que es consistente con su rol defensivo en trucha arcoiris.
Abstract:
The acute phase response is the immediate reaction developed by the organism, destined to resist the changes produced by tissue damage, trauma or pathogenic invasion. In mammals, apolipoproteins A-I (ApoA-I) and serum amyloid A (A-SAA) are considered negative and positive acute phase reactants, respectively. This implies that their hepatic expression is modified in response to pro-inflammatory cytokines released during acute phase. Since A-SAA is one of the main RFA in mammals, and has been scarcely studied in fish, and also taking into account that ApoA-I appears to have an important role in the innate immunity in teleost fish; it was interesting to evaluate its participation in the acute phase response in rainbow trout. By means of RT-PCR it was demonstrated that the expression of a-saa is induced in primary defensive barriers, in tissues like fat and skeletal muscle and in lymphohematopoietic organs, in response to an inflammatory stimulus, suggesting an important role for A-SAA in local immunity. Surprisingly, it was impossible to demonstrate the presence of A-SAA in the plasma of sick fish by Western blot analysis using antisera against a trout SAA peptide obtained and characterized during this thesis work, however the protein was detected by immunohistochemistry in muscle fibres of a sick fish. Moreover, the A-SAA label colocalized with thioflavin T staining, which specifically detects amyloid-like aggregates. On the other hand, no substantial changes in the levels of apoA-I hepatic expression or ApoA-I plasma concentration, were detected in sick fish, which is consistent with its defensive role in rainbow trout.
Palabras Clave:
trucha arco iris; apolipoproteínas; respuesta inmune
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Villarroel Espíndola, Franz Dominick
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2007/fcv722e/doc/fcv722e.pdf