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Título:
Expresión, identidad y actividad farmacológica de receptores de melatonina en la glándula adrenal de rata
Autor:
Henríquez Cárdenas, Mauricio Gabriel
Profesor Patrocinante:
Richter Becerra, Hans Georg
Grado a Optar:
Licenciado en Ciencias Biológicas
Materia:
receptores de melatonina - veterinaria; glándulas suprarrenales - veterinaria
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Ciencias
Año de Aceptación:
2007
Resumen:
Evidencia reciente sugiere que la producción circadiana de glucocorticoides adrenales es regulada no sólo por ACTH, inervación y factores intra-adrenales, sino también por expresión local de genes reloj y la neurohormona melatonina. Sin embargo, existe escasa evidencia indicando acciones directas de melatonina sobre función adrenal, tal como la demostración de expresión de receptores funcionales de melatonina en este tejido; particularmente en roedores nocturnos. En el presente trabajo, realizamos experimentos de RT-PCR convencional, clonamiento, secuenciación, PCR en tiempo real y ensayos de unión y desplazamiento de 2-[^125I]iodomelatonina en la glándula adrenal de rata. Nuestros resultados demuestran que este tejido expresa los mRNAs codificantes para receptores de melatonina tanto de membrana (MT1 y MT2) como nucleares (RORα), y presenta unión de 2-[^125I]iodomelatonina a las 2200 pero no 0800 h, la cual es específica, saturable, reversible y de alta afinidad (constante de disociación = 14.22 ± 1.23 pM; capacidad máxima de unión = 0.88 ± 0.02 fmol/mg proteína). En conjunto, estos y otros hallazgos de nuestro laboratorio, incluyendo la detección inmunoquímica del receptor MT1 en adrenal obtenida a las 2200 pero no 1000 h; indican no sólo expresión, sino también una variación diurna bien definida de receptores de melatonina farmacológicamente activos en la glándula adrenal de rata; alcanzando un máximo durante la transición luz/oscuridad. El mecanismo de acción y el papel jugado por melatonina en la función adrenal necesitan ser investigados de aquí en adelante.
Abstract:
Recent evidence suggests that circadian production of adrenal glucocorticoids is regulated not only by ACTH, innervation and intra-adrenal factors, but also by local clock gene expression and the neurohormone melatonin. However, undeniable evidence for direct actions of melatonin on adrenal function -such as demonstration of functional melatonin receptors expression in this tissue- is sparse, particularly in nocturnal rodents. Here, we carried out experiments of conventional RT-PCR, cloning, sequencing, qPCR, and 2-[^125I]iodomelatonin binding and competition studies in the rat adrenal gland. Our results demonstrate that this tissue expresses the cognate mRNAs encoding for MT1 and MT2 membrane-bound and RORα putative nuclear melatonin receptors, and displays 2-[^125I]iodomelatonin binding at 2200 but not 0800 h, which is specific, saturable, reversible and of high affinity (dissociation constant = 14.22 ± 1.23 pM; maximal binding capacity = 0.88 ± 0.02 fmol/mg protein). On the whole, these and other findings of our laboratory (including immunochemical detection of the MT1 receptor in adrenal collected at 2200 but not 1000 h), indicate not only expression but also a well-defined diurnal variation of pharmacologically active melatonin receptors in the rat adrenal gland, peaking during the light/dark transition. Henceforth, the mechanism of action and role of melatonin in rat adrenal function remain to be investigated.
Palabras Clave:
receptores de melatonina - veterinaria; glándulas suprarrenales - veterinaria
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Henríquez Cárdenas, Mauricio Gabriel
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2007/fch519r/doc/fch519r.pdf