Información detallada Tesis (Metadatos y Resúmenes)

Título:
Patrón circadiano de expresión de genes reloj en glándula adrenal de rata
Autor:
Abarzua Catalán, Lorena Alejandra
Profesor Patrocinante:
Richter Becerra, Hans Georg
Grado a Optar:
Bioquímico - Licenciado en Bioquímica
Materia:
ritmo circadiano; ritmos biológicos; sistemas biológicos
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Bioquímica
Año de Aceptación:
2007
Resumen:
El reloj circadiano maestro del núcleo supraquiasmático (NSQ) controla la ritmicidad diurna del organismo, siendo la luz su señal sincronizadora dominante. En los últimos años, también se han detectado osciladores circadianos en diferentes tejidos periféricos de mamíferos diurnos y nocturnos. Durante el desarrollo de la presente investigación estos hallazgos incluyeron la glándula adrenal de ratón y mono. En esta Tesis, se utilizó PCR semicuantitativo y en tiempo real para analizar la expresión de los genes reloj clave Per2, Cry2, Bmal1 y Clock, asi como del gen del receptor de melatonina MT1 en la glándula adrenal de ratas sujetas a un fotoperíodo LO 12:12. Los resultados indican una expresión circadiana robusta de los genes reloj Per2 y Bmal1, mientras que Cry2 exhibió una baja oscilación en las 24-h. El transcrito de Clock no cambió con la hora del día. También seguimos la expresión circadiana de las proteínas CLOCK y PER1; de las cuales sólo PER1 presentó una expresión oscilatoria. Detectamos una marcada variación diurna del mRNA de MT1 (con máximo a las 1800-2200 h); lo cual concuerda con (i) nuestros resultados previos indicando la presencia de la proteína MT1 y unión específica de 2-[ˆ125I]iodomelatonina a las 2200 pero no 0800-1000 h, y (ii) observaciones publicadas de variaciones diurnas de la trasncripción de MT1 en el NSQ y páncreas de rata. Actualmente estamos investigando acciones de melatonina sobre transcripción de genes reloj en la adrenal in vitro. En conjunto, nuestros resultados apuntan fuertemente a la existencia de un oscilador periférico en la adrenal de rata. Queda por dilucidar si éste contribuye a la regulación de las complejas vías de secreción de glucocorticoides adrenales en roedores nocturnos.
Abstract:
The central circadian oscillator of the suprachiasmatic nucleus (SCN) controls diurnal rhythmicity of the body with light as its dominant zeitgeber. In the last few years, oscillators have also been detected in different peripheral tissues of diurnal and nocturnal mammals. These findings even included the adrenal gland of mouse and monkey while the present investigation was under way. In this study, semiquantitative and real-time PCR were used for expression analysis of the core clock genes Per2, Cry2, Bmal1 and Clock, as well as of the MT1 membrane-bound melotanin receptor gene in the adrenal gland of rats entrained to LD 12:12. The results presented here indicate a robust circadian expression of Per2 and Bmal1 clock genes, whereas Cry2 displayed a very low 24-h oscillation. The Clock transcript did not change with the time of the day. We were also able to follow the circadian expression pattern of the CLOCK and PER1 proteins by immunoblotting; with only the latter displaying a circadian expression pattern. As for the MT1 melatonin receptor transcript, we detected a marked diurnal variation (peaking at the 1800-2200 h time interval); which agrees well with (i) our previous findings indicating presence of MT1 protein and 2-[ˆ125I]iodomelatonin binding at 2200 but not 0800-1000 h, and (ii) reported observations of diurnal variations of MT1 transcription in the rat SCN and pancreas. We are currently investigating actions of melatonin on adrenal clock transcription in vitro. Altogether, our results strongly support the existence of a peripheral oscillator in the rat adrenal. Whether it contributes to regulate the complex adrenal glucocorticoids secretory pathways of nocturnal rodents remains to be elucidated.
Palabras Clave:
ritmo circadiano; ritmos biológicos; sistemas biológicos
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Abarzua Catalán, Lorena Alejandra
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2007/fca118p/doc/fca118p.pdf