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Título:
Evaluación del efecto de los principios activos androfolido y 14-deoxiandrografolido en la estimulación de linfocitos B por Lipopolisacárido de Salmonella enteritidis
Autor:
Schwenke Hoffmann, Evelyn Rosemarie
Profesor Patrocinante:
Folch V., Hugo
Grado a Optar:
Químico Farmacéutico - Licenciado en Ciencias Farmacéuticas
Materia:
respuesta inmune; sustancias inmunológicas; plantas medicinales
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Química y Farmacia
Año de Aceptación:
2006
Resumen:
En el presente trabajo se estudió el efecto de los principios activos Andrografolido y 14-Deoxiandrografolido (14-DAP) de Andrographis paniculata, en la estimulación de linfocitos “in vitro” e “in vivo”. Para realizar este estudio se utilizaron las células del bazo de ratones RK y C57 black o de ratas Sprague dawley. Para lograr este objetivo se usó la técnica de transformación blástica, que consistió en hacer cultivos celulares estimulados o no con lipopolisacárido (LPS) y el principio activo en concentraciones crecientes. Los linfocitos se cultivaron por 48 horas a 37° C, luego, cada cultivo recibió 0,5 μCi de timidina tritiada, fueron cultivadas por 24 horas adicionales y por último se evaluó la incorporación del ADN de las células en cultivo. Además, en una serie experimental los animales en estudio se inocularon por 6 días consecutivos con el principio activo en concentraciones diferentes, luego los animales fueron sacrificados, se extrajo el bazo y los linfocitos esplénicos fueron cultivados siguiendo la técnica antes mencionada. Los resultados obtenidos mostraron que andrografolido administrado solo a células esplénicas “in vitro”, aumenta la síntesis de ADN. Este efecto no se observó en las células estimuladas por el LPS. Por otro lado, el extracto de Andrographis paniculata administrado “in vivo” causó una disminución de la respuesta linfoblástica en las células estimuladas “in vitro” con LPS. El 14-DAP generó una moderada disminución de la síntesis de ADN en cultivos estimulados con LPS.
Abstract:
In this work the effect of andrographolide and 14-deoxyandrographolide (14-DAP) in the DNA synthetic response of B cells was investigated. These two molecules were obtained from Andrographis paniculata, used in Asia as herbal medicine since ancient times. There are many reports in relation with the immune-stimulatory effect of Andrographis paniculata extract and several studies on the effect of andrographolide, which is a diterpenic labdane present in high quantity in the aerial part of the plant. The specific aim of this work was to investigate the possible stimulant role of andrographolide and 14-DAP in the B cell when is stimulated “in vitro” by lipopolisacaride (LPS). With this purpose, spleen cells from Sprague Dawley rats, RK or Cˇ57BL mice were obtained and cultured in presence or absence of the molecules under study, with or without LPS as stimulant. In order to evaluate the spontaneous DNA synthesis or the blast transformation induced by LPS, the cultures were pulsed with tritiated thymidine, the cells harvested and the incorporation of the radiolabelled nucleotide evaluated in a β-counter. The results were expressed as counts per minute (cpm) in some cases, and in others as Stimulation Index which is the reason of the cpm of the experimental group divided by the cpm obtained in the control group. The results indicate that “in vitro”, andrographolide alone, in a very narrow dose, was able to stimulate DNA synthesis in cultures with no extra-stimulus, but when the cultures were stimulated with LPS, this stimulatory effect disappeared. In animals in which Andrographis paniculata extract was given “in vivo”, the stimulation of B cells by LPS was lower than in the control lymphocytes obtained from non injected animals. On the other hand, 14-DAP shows a negative effect in the LPS stimulation of B cells using our experimental system.
Palabras Clave:
respuesta inmune; sustancias inmunológicas; plantas medicinales
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Schwenke Hoffmann, Evelyn Rosemarie
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2006/fcs414e/doc/fcs414e.pdf