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Título:
Determinación de progesterona en leche mediante EIA: una alternativa de diagnóstico de gestación en cabras
Autor:
Seperiza Wittwer, Astrid Jeanisse
Profesor Patrocinante:
Correa Soto, Jorge E.
Grado a Optar:
Médico Veterinario - Licenciado en Medicina Veterinaria
Materia:
cabras; reproducción del ganado caprino; ganado caprino - producción animal
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias Veterinarias
Escuela:
Escuela de Medicina Veterinaria
Año de Aceptación:
2005
Resumen:
El objetivo del presente estudio fue diagnosticar gestación en cabras mediante la determinación de progesterona cualitativa y cuantitativa en leche entera a los 21 días post cubierta por medio del uso de enzimainmunoanálisis (EIA). Para ello se utilizó 20 cabras mestizas Saanen previamente identificadas, clínicamente sanas, sincronizadas y cubiertas por monta dirigida. Las muestras de leche fueron recolectadas en la ordeña de la mañana durante el estro (M1), en el día 10 de la fase luteal (M2) y a los 21 días post cubierta (M3) comparándose ésta con los valores M1 y M2 para poder discriminar entre preñez y no preñez. Se emplearon dos kits de EIA, uno cualitativo y otro cuantitativo. En el primero, se comparó la coloración de las muestras M3 con los estándares y las muestras M1 y M2, considerando diagnóstico positivo de preñez cuando coincidieron con M2 y el estándar de progesterona alta, presentando una coloración amarillo pálida. En el ensayo cuantitativo, se obtuvo la densidad óptica de las muestras mediante un equipo lector para ELISA y mediante la construcción de una curva logarítmica se determinó las concentraciones de progesterona y se estableció los valores promedios para M1 y M2, se consideró indicador positivo de preñez a los valores M3 que se asemejaron al promedio de M2. Estos ensayos fueron comparados con radioinmunoanálisis (RIA) y ultrasongrafía transrectal. Mediante la determinación cuantitativa de progesterona por EIA se obtuvo valores inferiores a 4 ng/ml en la fase periestral y superiores a 60 ng/ml en la fase luteal. A los 21 días post cubierta se determinó un 100% de gestación mediante EIA cualitativo, EIA cuantitativo y RIA, a diferencia de la ultrasonografía que presentó sólo un 65% de preñez. Estos resultados se verificaron mediante ultrasonografía a los 53 días post cubierta, confirmando un 100% de preñez y de esta forma ratificando los resultados obtenidos por EIA y RIA. De este estudio se concluye que es posible realizar diagnóstico de gestación temprana en cabras, a los 21 días post cubierta, mediante la detección de progesterona cualitativo y cuantitativa en leche entera por EIA y que el kit para la determinación cualitativa podría incorporarse como una nueva herramienta al manejo reproductivo caprino por sus atributos en la utilización en terreno, además de no requerir material adicional, ser totalmente inocuo para el animal, ser rápido y fácil de usar.
Abstract:
DETERMINATION OF PROGESTERONE IN MILK BY EIA: AS AN ALTERNATIVE TO PREGNANCY DIAGNOSIS IN DAIRY GOATS. The aim of this study was to diagnose pregnancy in dairy goats through the determination of qualitative and quantitative progesterone in whole milk at 21 days after mating using enzymeimmunoassay (EIA). Twenty healthy goats were selected, synchronized and handmated. Milk samples were collected in the morning milking: during oestrus (M1), day 10 of the luteal cycle (M2) and day 21 after mating (M3). M3 were compared with M1 and M2 values to discriminate between pregnant and non pregnant. For pregnancy diagnosis, two kits of EIA were used, one qualitative and other quantitative. For the qualitative essay, the colour of M3 samples were compared with the standards and with M1 and M2 samples. Positive pregnancies were considered when M3 samples resembled to M2 and to high progesterone standard, which meant a pale yellow colour. In the quantitative assay kit, the optical density of the samples was obtained with an ELISA reader equipment. By making a logaritmic curve, the concentration of progesterone was determined. The average values were obtained for M1 and M2, and finally, they were considered positive pregnancy diagnosis when M3 values were similar to the average of the concentration of M2. Those essays were compared with radioimmunoassay (RIA) and transrectal ultrasound. By means of quantitative determination of progesterone by EIA, values lower than 4 ng/ml were obtained close to oestrus and values higher than 60 ng/ml in the luteal cycle. The accuracy of early pregnancy diagnosis by qualitative EIA, quantitative EIA and RIA were 100% at 21days after mating, but ultrasound was only 65%. Those results were confirmed by ultrasound examination 53 days after mating and the pregnancy was 100%. With this result is ratified the essays by EIA and RIA. This study concludes that it is possible to have early pregnancy diagnosis in dairy goats, as early as 21 days after mating, with progesterone determination in whole milk by EIA. The qualitative assay kit could be incorporated as a new instrument to the reproductive management of dairy goats because it can be used in field, without additional materials, it is absolutely safe for the animal, simple and quick to use.
Palabras Clave:
diagnóstico de gestación; cabras; progesterona; EIA; RIA y ultrasonografía
Palabras Clave:
pregnancy diagnosis; dairy goats; progesterone; EIA; RIA and ultrasound
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Seperiza Wittwer, Astrid Jeanisse
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2005/fvs479d/doc/fvs479d.pdf