Información detallada Tesis (Metadatos y Resúmenes)

Título:
Rol del calcio citosólico en las variaciones de pH intracelular inducido por propionato en neutrofilos de bovino
Autor:
Triviños Castillo, Francisco Santiago
Profesor Patrocinante:
Burgos Aguilera, Rafael Agustín
Grado a Optar:
Químico Farmacéutico - Licenciado en Ciencias Farmacéuticas
Materia:
calcio citosólico; neutrófilos; bovinos
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Química y Farmacia
Año de Aceptación:
2005
Resumen:
Esta tesis, evaluó en neutrófilos de bovino los mecanismos de regulación de los cambios de pH intracelular inducido por propionato, un ácido graso de cadena corta sintetizado por bacterias presentes en infecciones peridentales y gastroinstestinales. Se evaluó el rol del aumento Ca2+ intracelular y el ingreso de Ca2+ externo, así mismo el rol del intercambiados Na+/H+ (NHE), de canales de H+ y de las vías PKC, p38 y ERK. Para analizar la movilización de calcio intracelular y los cambios de pH se utilizaron técnicas de espectrofluorimetría utilizando FURA2-AM y BCECF-AM, respectivamente. Propionato produjo un aumento Ca+2 citosplasmático mediante el ingreso de Ca+2 externo y la liberación de calcio intracelular. El aumento de calcio intracelular estuvo asociado a la acidificación intracelular, y el ingreso de calcio extracelular con la alcalinización citosólica. El bloqueo de los canales de H+ con Zn2+ y la inhibición de NHE con amiloride resultó en la inhibición de la acidificación y alcalinización, respectivamente. La inhibición de p38 y ERK fue evaluada con SB283580 30 µM y UO126 1µM respectivamente. SB283580 redujo la acidificación máxima inducida por propionato y UO126, inhibió la alcalinización intracelular. Por otro lado, Gö6850, un inhibidor selectivo de PKC, no produjo cambios en acidificación o alcalinización intracelular. Los resultados permiten concluir que propionato controla la acidificación, en parte, a través del ingreso de un canal de protones que es dependiente de la liberación de Ca+2 intracelular y de p38. Mientras que la alcalinización inducida por propionato es dependiente de la entrada de Ca+2 externo y de ERK1/2.
Abstract:
Propionate is a short chain fatty acid synthesized by bacteria present in periodontal and gastrointestinal infections. It is an agonist of receptors coupled to G protein (GPR43) in neutrophils and is associated to the production of IP3, release of Ca2+ and activation of ERK1/2. This thesis, evaluated the mechanisms that regulate the intracellular pH induced by propionate in bovine neutrophils. The role of an increase in intracellular Ca2+ and external Ca2+, and the role of the Na+/H+ (NHE) interchange, of H+ channels and PKC, p38 and ERK pathways was studied. To analyze the mobilization of intracellular Calcium and the pH changes, spectrofluorometry FURA2-AM and BCECF-AM were used, respectively. Propionate augmented the citoplasmatic Ca+2 via entry of external Ca+2 and release of intracellular calcium. The increase of intracellular calcium was associated with intracellular acidification, and the entry of intracellular calcium with citosolic alkalinization. The blockade of the H+ channels with Zn2+ and the inhibition of NHE with amiloride resulted in the inhibition of the acidification and alkalinization, respectively. The inhibition of p38 and ERK was evaluated with SB283580 30 M and UO126 1 M, respectively. SB283580 reduced the maximum acidification induced by propionate and UO126 inhibited the intracellular alcalinization. Gö6850, a selective inhibitor of PKC, did not caused intracellular acidification or alkalinization. The results permit to conclude that propionate controls the acidification in part, through the entry of a proton channel that is dependant of the liberation of intracellular Ca+2 and p38. On the other hand, the alkalinization induced by propionate is dependant on the entry of external Ca+2 and ERK1/2.
Palabras Clave:
calcio citosólico; neutrófilos; bovinos
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Triviños Castillo, Francisco Santiago
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2005/fct841r/doc/fct841r.pdf