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Título:
Detección del virus hepatitis E (VHE) mediante RT-PCR y M.E. en aguas servidas, heces de porcinos y sueros humanos en Valdivia, X Región, Chile
Autor:
Ruíz Hipp, Mauricio Daniel
Profesor Patrocinante:
Riedemann González, Stella Eugenia
Grado a Optar:
Químico Farmacéutico - Licenciado en Ciencias Farmacéuticas
Materia:
hepatitis; enfermedades transmisibles; técnicas y procedimientos de laboratorio
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Química y Farmacia
Año de Aceptación:
2005
Resumen:
DETECCION VHE MEDIANTE RT-PCR Y M.E. EN AGUAS SERVIDAS, HECES DE PORCINOS Y SUEROS HUMANOS EN VALDIVIA, X REGION, CHILE. La hepatitis es una reacción inflamatoria del hígado, principalmente causada por virus. Dicha enfermedad es de alta prevalencia en países en desarrollo con escasas políticas sanitarias en cuanto a tratamiento de aguas residuales y potabilización. Los agentes etiológicos más frecuentes son virus denominados alfabéticamente de la A a la E, siendo de especial interés el virus de la hepatitis E (VHE) por su similitud con el virus de la hepatitis A (VHA). El objetivo de la investigación fue desarrollar un protocolo para la detección del VHE en aguas servidas, heces de porcino y sueros humano en Valdivia, X Región, Chile. El estudio se realizó entre Diciembre de 2003 y Septiembre de 2004, en donde se analizaron, 10 muestras de aguas servidas tomadas de la red de alcantarillado y planta de tratamiento de aguas servidas (pre y post tratamiento), 5 muestras de sueros humanos positivas a ELISA IgG, 14 muestras de heces de porcinos serológicamente positivos a ELISA IgG y macerado de 14 hepatopancreas de Mytilus chilensis alimentados con aguas servidas de la red de alcantarillado. Para la detección del VHE se utilizaron protocolos estandarizados de extracción de ARN (ácido ribonucleico) y RT-PCR (Transcriptasa reversa acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa) en aguas servidas, sueros humano, heces de cerdo y hepatopancreas con secuencias genómicas humanas y de cerdo. Además la última muestra de hepatopancreas del grupo de ensayo fue seleccionada para realizar microscopía electrónica. En las muestras analizadas por RT- PCR no se detectó VHE en aguas servidas concentradas, sueros humanos, fecas de porcino ni moluscos. La no detección de VHE humano o porcino por RT-PCR puede deberse a que existan variables genómicas de VHE presente en Chile no detectadas por los partidores utilizados.
Abstract:
HEV DETECTION THROUGH RT-PCR AND M.E. IN SEWAGE WATER, SWINE FAECES AND HUMAN SERUM IN VALDIVIA, X REGION, CHILE. Hepatitis is a liver inflammation, mainly caused by viruses. This illness is highly prevalent in underdeveloped countries with lack of sanitary policies regarding sewage and drinking water. Viruses are consider the most frequent etiologic agents and are called alphabetically from A to E. Hepatitis E virus (HEV) is of particular interest due to its similarity to hepatitis A virus (HAV). The aim of this study was to develop a protocol for the detection of HEV in sewage water, swine faeces and human serum samples in Valdivia city, X region, Chile. Ten samples from the sewage systems and from the water treatment plant (pre and pos treatment), 5 human serum samples positive to ELISA IgG, 14 samples of swine faeces positive to ELISA IgG and 14 macerated hepatopancreas of Mytilus chilensis cultured in sewaste waters the sewage systems were analyzed between December 2003 and September 2004. For the HEV detection, standard protocols of extraction for RNA (ribonucleic acid) and RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction) on human serum samples, swine faeces and mussel hepatopancreas, using human and swine primers. Additionally the last sample of mussel hepatopancreas was selected in order to carry out an electron microscopy. From the samples analyzed by RT-PCR, neither sewage water nor swine faeces, human serum and mussels, HEV was detected. The lack of detection of both human or swine HEV by RT-PCR, can be explained by genomic variables of HEV present in Chile that are not detected by the primers used.
Palabras Clave:
hepatitis; enfermedades transmisibles; técnicas y procedimientos de laboratorio
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Ruíz Hipp, Mauricio Daniel
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2005/fcr934d/doc/fcr934d.pdf