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Título:
Evaluación de la producción de citoquinas del tipo Th1 y Th2 en diferentes subpoblaciones de linfocitos T de bovinos sensibilizados con antígeno de Brucella abortus RB51 y Brucella abortus RB51SOD
Autor:
Oyarzún Alvarez, María José
Profesor Patrocinante:
Folch Vilches, Hugo
Grado a Optar:
Bioquímico - Licenciado en Bioquímica
Materia:
proteínas de origen animal; linfocitos; bovinos
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Bioquímica
Año de Aceptación:
2005
Resumen:
En el presente trabajo se estudió el rol de la proteína Cu/Zn superóxido dismutasa (SOD) de Brucella en la respuesta inmune bovina contra esta bacteria. Estudios previos en ratones han demostrado que SOD es un buen inductor de la respuesta inmune del tipo TH1, mediada por células T y conocida por ser determinante para la defensa contra patógenos intracelulares. Si esta característica de la proteína SOD, demostrada en el modelo experimental murino, puede ser demostrada en la especie bovina, se abre la posibilidad de mejorar la vacunación en esta especie usando vacunas de DNA que lleven incerto el gen de SOD o cepas que sobreexpresen dicho gen. Con el fin de demostrar esta posibilidad, grupos de 5 animales fueron vacunados con la vacuna comercial B. abortus RB51 o con la cepa recombinante que sobreexpresa SOD, los animales vacunados y sus controles inyectados con PBS, fueron sangrados y se aislaron los linfocitos periféricos. Después de la inmunización, se determinaron las subpoblaciones T CD3+, CD4+, CD8+ y γδ, luego se determinó la capacidad de SOD de inducir transformación blástica y el tipo de citoquinas sintetizadas. Los resultados demostraron que ni la cepa comercial RB51 ni la cepa recombinante de Brucella que sobreexpresa SOD, indujeron un cambio significativo en las subpoblaciones T estudiadas, además SOD fue incapaz de inducir transformación blástica “in vitro” en linfocitos obtenidos de animales inmunizados. Por otro lado, la proteína bajo estudio no indujo la síntesis de mRNA para INF-γ esperada, por el contrario, SOD fue capaz de aumentar después de 24 horas de incubación la síntesis de mRNA para IL-4, en estas mismas células. De estos resultados, podemos concluir que SOD en bovinos no es un buen estimulante de inmunidad mediada por células T, como fue demostrado en ratones.
Abstract:
In the present work we studied the role of Brucella Cu/Zn superoxide dismutase (SOD) in the bovine immune response against Brucella. Previous work in mice demostrate that SOD is a good antigen to induce a TH1 immune response and therefore an important inducer of T cell mediated response against intracellular pathogens. If this characteristic of SOD demostrated in the murine experimental model, can be also shown in bovines, it opens the possibility to improve the vaccination of this specie using the DNA or overexpression vaccine approach. In order to demostrate this possibility, groups of five bovines were vaccinated with the comercial RB51 Brucella vaccine or with the recombinant strain that overexpress SOD. Immunized animals and its controls were bled and the peripheral lymphocytes studied. Then, CD3+, CD4+, CD8+ and T γδ subpopulation were determined, as well as the capacity of SOD to induce blast transformation and the type of cytokine synthesized. The results demostrate that neither, the comercial RB51 strain or the recombinant Brucella strain induced a significative change in the T subpopulations studied. SOD was unable to induce blast transformation “ in vitro” when lymphocytes were obtained from immunized animals and the protein under study did not induce INF-γ mRNA as expected. By contrary, SOD was able to increase IL-4 after 24 hours of incubation of peripheral T lymphocytes. We may conclude that SOD in bovines is not a good stimulant for cell mediated immunity at the contrary of previously demostrated in mice.
Palabras Clave:
proteínas de origen animal; linfocitos; bovinos
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Oyarzún Alvarez, María José
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2005/fco.98e/doc/fco.98e.pdf