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Título:
Calicreína glandular en Cyprinus carpio, efecto de 17β-Estradiol en la aclimatización del pez y participación en el sistema inmune innato en Salmo salar
Autor:
Haussmann Bielefeld, Denise Alicia
Profesor Patrocinante:
Figueroa Valverde, Jaime Eugenio
Grado a Optar:
Bioquímico - Licenciado en Bioquímica
Materia:
prolactina; estradiol; calicreina; sistema inmune - veterinaria
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Bioquímica
Año de Aceptación:
2005
Resumen:
Calicreína glandular o tisular (CG) pertenece a la familia de las serinas proteasas, con una alta especificidad de sustrato, teniendo principalmente su sitio de corte en residuos de arginina y lisina. En la hipófisis, calicreína sólo está presente en las células lactotropas productoras de prolactina y se cree que procesa a prolactina. La presencia de calicreína en peces no ha sido estudiada en detalle. En este trabajo se purificó CG y se generó un anticuerpo policlonal anti-calicreína del pez Cyprinus carpio. Con esta herramienta se evaluó la presencia de calicreína en diversos tejidos del pez, tanto en peces tratados con estrógenos y peces control, evidenciándose cambios en la intensidad de inmunorreacción. La relevancia de los estrógenos es que son productos de degradación de compuestos contaminantes en el agua. Teniendo presente estos antecedentes, los peces y particularmente la variación de CG podrían servir como biomarcador de contaminación del agua. Por otro lado se evalúo la presencia de CG en tejido de salmones, teniendo en cuenta que los peces poseen un sistema inmune innato altamente desarrollado donde diversas enzimas como lisozima y otras proteasas juegan un rol determinante. Por ello se realizaron experimentos en Salmo salar tanto en peces sanos y desafiados frente a un patógeno bacteriano Piscirickettsia salmonis, analizando la presencia de CG en órganos, leucocitos y mucus. Una importante contribución de este trabajo fue el hallazgo de una clara diferencia de intensidad de inmunorreacción de calicreína entre peces sanos y desafiados al patógeno, cuya función específica en el sistema inmune innato se pretende dilucidar a futuro.
Abstract:
Glandular or tissue Kallikrein (GK) belongs to the family of serine proteases, with a high substrate specificity, cutting between arginine and lysine residues. In the hypophysis, Kallikrein is only present in the lactotroph cells that produce prolactin and are involved in the processing of prolactin. The presence of kallikrein in fish has not been studied. In this work Kallikrein was purified from the fish Cyrpinus carpio and a polyclonal antibody anti-carp kallikrein was generated. This tool was used to evaluate the presence of kallikrein in diverse carp organs. Significant changes of the intensity of the immunoreaction was detected in carp injected with estrogen compared to control fish. The physiological relevance of the estrogenic effect on expression of kallikrein is important in the context of estrogenic potential of contaminating substances in water. Therefore, the expression pattern of kallikrein in fish could serve as biomarker for water contamination. On the other hand, the presence of GK was evaluated in salmons organs, a fish that exhibit a highly developed innate immune system where proteases play important roles. For that reason experiments were performed in Salmo salar, healthy and challenged with a bacterial pathogen, Piscirickettsia salmonis, analyzing the presence of GK in different organs, leukocytes and mucus. A clear difference of intensity of immunoreaction of kallikrein between healthy and challenged fish to the pathogen was observed. These findings constitute a very important contribution to reveal the role of kallikrein in the innate immune system of fish.
Palabras Clave:
prolactina; estradiol; calicreina; sistema inmune - veterinaria
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Haussmann Bielefeld, Denise Alicia
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2005/fch377c/doc/fch377c.pdf