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Título:
Identificación de factores de transcripción en queratinocitos humanos estimulados con anginina-vasopresina y lisina-bradicinina
Autor:
Pavicic Rojas, María Francisca
Profesor Patrocinante:
Vidal Villa, Alejandra
Grado a Optar:
Bioquímico - Licenciado en Bioquímica
Materia:
queratinocitos; arginina vasopresina; epidermis
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias
Escuela:
Escuela de Bioquímica
Año de Aceptación:
2003
Resumen:
La epidermis es un epitelio estratificado queratinizado, cuya capa basal está formada de células madres o progenitoras. Estas células al entrar en división inician un programa de diferenciación altamente secuencial que las conduce progresivamente a la diferenciación terminal. Sin embargo, los factores que intervienen en la regulación de la proliferación y diferenciación de los queratinocitos humanos no han sido totalmente dilucidados. En el presente trabajo se estudió en cultivos de queratinocitos humanos la acción de los receptores V1 de vasopresina y B2 de cininas, sobre la expresión de factores reguladores de la transcripción tales como c-fos, Egr-1, ciclina A y D1 y la translocación nuclear del factor NF-kB, así como la expresión de (pro)filagrina, un marcador de la diferenciación terminal de las células epidérmicas. Para ello se estimularon cultivos subconfluentes de queratinocitos con 100 nM de arginina-vasopresina (AVP) y lisina-bradicinina (LBK) por diferentes períodos de tiempo los cuales fueron procesados mediante Western-blotting. Los resultados obtenidos demuestran que tanto AVP y LBK inducen la expresión de genes de respuesta temprana como c-fos y Egr-1 y la expresión de proteínas reguladoras del ciclo celular como ciclina D1. Además, LBK induce la translocación nuclear del factor de transcripción NF-kB y ejerce un efecto moderado en la expresión de (pro)filagrina. Estos resultados sugieren que la activación de los receptores V1 de vasopresina y B2 de cininas por sus ligandos específicos inducen segundas señales más bien restringidas a cada receptor. Mientras, la activación del receptor V1 de vasopresina puede estar asociada a proliferación de los queratinocitos, el receptor B2 de cininas induce una limitada diferenciación de éstos.
Abstract:
Basal cells from human epidermis correspond to progenitor cells which under specific stimulation enter to cellular cycle and start a highly sequential program of differentiation that progressively lead them to terminal differentiation. However, the regulation of both keratinocyte proliferation and differentiation has not been completely elucidated. At the present work we have studied the effect of vasopressin V1 and kinin B2 receptor triggering on c-fos, Egr-1, cyclin A and D1 expression and nuclear translocation of the transcription factor NF-kB in the human keratinocytes. In addition, we wonder if vasopressin V1 and kinin B2 receptor were or not involved in (pro)filaggrin expression, a marker of keratinocyte terminal differentiation. To this purpose sub-confluent cultures of human keratinocytes were stimulated with the specific ligands to vasopressin V1 and kinin B2 receptors arginine-vasopressin (AVP) and lysine-bradykinin (LBK), respectively, for different periods of times. Proteins extracts were separated by SDS-PAGE and processed to Western-blotting. Second signal were recognized using specific antibodies revealed with a chemiluminescence method. The results shown that AVP and LBK induce the expression of genes of early response c-fos and Egr-1 and the cell cycle regulatory protein cyclin D1. Moreover, LBK but not AVP stimulated nuclear translocation of NF-kB and exerted a moderate effect on (pro)filaggrin expression. These results suggest that the activation of vasopressin V1 and kinin B2 by specific ligands induce second signals rather restricted to each receptor. Whereas activation of vasopressin V1 receptors could be associated to keratinocytes proliferation, kinin B 2 receptors induce a limited keratinocyte differentiation.
Palabras Clave:
queratinocitos; arginina vasopresina; epidermis
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Pavicic Rojas, María Francisca
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2003/fcp338i/doc/fcp338i.pdf