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Título:
Protocolo de transformación genética de tres cultivares de papa Solanum Tuberosum L. ssp Tuberosum. (Hawkes), con el gen magainina 2 mediante Agrobacterium Tumefaciens (Sm. y Town.) Conn.
Autor:
Torres Barrientos, Alejandro Esteban
Profesor Patrocinante:
Henzi Gutierrez, Maria Ximena
Grado a Optar:
Ingeniero Agrónomo - Licenciado en Agronomía
Materia:
cultivo de papa; mejoramiento genético
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias Agrarias
Escuela:
Escuela de Agronomía
Año de Aceptación:
2002
Resumen:
Dentro de las enfermedades bacterianas que atacan al cultivo de la papa (Solanum tuberusum L.) en el sur de Chile, se destaca la acción de género Erwinia, que provoca pudriciones blandas; y el género Streptomyces, que produce la sarna común. Las únicas formas de enfrentar estos problemas son de manera preventiva o a través del mejoramiento genético. Dentro de este último encontramos la ingeniería genética, que representa una alternativa interesante, ya que mantiene las características del cultivar incorporando sólo los genes de interés. Existen numerosos protocolos publicados para la transformación de S. tuberosum, sin embargo, ellos presentan una gran diversidad. El objetivo de este trabajo fue determinar una metodología eficiente de inoculación y tratamiento de los explantes previo y durante el proceso de transformación y regeneración, que conduzcan a generar un protocolo que permita la transferencia de genes líticos a cultivares de papa de importancia económica en Chile. Se utilizaron tres cultivares de papa: Desirée, Kennebec y Shepody, los cuales fueron transformados con el vector Agrobacterium tumefaciens cepa EHA105. Este vector posee el plasmidio pBINPLUS, en el que está contenido el gen magainina 2. Este gen codifica un péptido de acción lítica, que tendría una acción sobre Erwinia y Streptomyces. De acuerdo, a esta investigación, el protocolo óptimo de transformación comprendería la utilización de las bacterias diluídas en proporción de 1:10, explantes de entrenudo cortados en forma de disco y la utilización de ribósido de zeatina como fuente de citoquinina en regeneración.
Abstract:
Erwinia soft rot and common scab caused by Streptomyces spp. are among the most important bacterial diseases that affect potato tubers (Solanum tuberosum L.) in southern Chile. The only way of facing these problems is through prevention or genetic breeding. In the latter case, genetic engineering represents an interesting alternative, since it maintains cultivar characteristics by incorporating only the specific gene of interest. A number of protocols for the transformation for S. tuberosum have been published, however, they show great diversity in their methodology. The objective of this research was to determine an efficient methodology for the inoculation and treatment of the explants before and during the transformation and regeneration process. This methodology would lead to the generation of a protocol which allows to transfer litic genes to cultivares of economic importance in Chile. Three potato cultivars (Desirée, Kennebec and Shepody) were transformed using the vector Agrobacterium tumefaciens, strain EHA105. This carries the pBINPLUS plasmid, which contains the magainin 2 gen, that codifies for a peptide with litic activity, which would have an action upon Erwinia and Streptomyces. Results of this study showed that the most appropriate protocol of transformation would include the use of A. tumefaciens diluted up to a proportion of 1:10, cut explants in form of disc and the use of zeatin riboside as citokinin source in regeneration.
Palabras Clave:
cultivo de papa; mejoramiento genético
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Torres Barrientos, Alejandro Esteban
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2002/fat693p/doc/fat693p.pdf