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Título:
Determinación de la susceptibilidad de salmón del atlántico (Salmo salar), salmón coho (Oncorhynchus kisutch) y trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss) a un agente semejante a rickettsia (U2) aislado de puye (Galaxias maculatus)
Autor:
Cárdenas Villarroel, Pedro Eduardo
Profesor Patrocinante:
Enriquez Sais, Ricardo
Grado a Optar:
Médico Veterinario - Licenciado en Medicina Veterinaria
Materia:
salmón; infecciones por rickettsia
Universidad:
Universidad Austral de Chile
Facultad:
Facultad de Ciencias Veterinarias
Escuela:
Escuela de Medicina Veterinaria
Año de Aceptación:
1998
Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue determinar la susceptibilidad de Salmón del Atlántico (Salmo salar), Salmón Coho (Oncorhynchus kisutch) y Trucha Arcoiris (Oncorhynchus mykiss) a la inoculación intraperitoneal (i.p.) de U2, un agente semejante a Rickettsia (RLO) aislado de Puye (Galaxias maculatus) colectado del Lago Llanquihue. El material de la investigación estuvo constituido por 47 Salmones del Atlántico, 47 Salmones Coho y 44 Truchas Arcoiris. Además se mantuvo un grupo control con 15 peces (5 S. del Atlántico, 5 S. Coho y 5 T. Arcoiris), todos mantenidos en el Laboratorio de Ictiopatología de la Universidad Austral de Chile. La totalidad de los peces fueron inoculados simultáneamente el día 7 de Agosto de 1998, con 0.1 ml de U2 aislado de Puye en dosis de 10^2 TCID50 / pez vía i.p, el grupo control también fue inoculado con 0.1 ml de medio de cultivo de células (MEM) vía i.p. Se determinó la presencia del agente rickettsial aplicando los Postulados de Koch. Sólo se pudo realizar un esquema de trabajo en Salmones del Atlántico ya que fue la única especie en la cual se presentaron signos clínicos y mortalidad asociada, en cambio en el grupo experimental de S. Coho y T. Arcoiris se procedió a sacrificar 8 a 10 peces diarios de cada grupo 30 días post-inoculación, el grupo control se sacrificó al final del ensayo. Los resultados obtenidos en este estudio demostraron que todos los S. del Atlántico murieron, comprobando mediante los postulados de Koch que el organismo aislado era el causante de la enfermedad. La signología clínica interna se caracterizó por ser hemorrágica. El diagnóstico histopatológico de Salmo salar en este estudio es: Hepatitis necrotizante multifocal; Nefritis intersticial y túbulonefrosis; Esplenitis difusa. Microscópicamente las improntas de hígado, bazo y riñon teñidos con Gram, presentaron formas cocoides, gram negativas, de tamaño muy pequeño de 0.2 a 0.8 um de diámetro, en cúmulos intra y extracelulares. La tinción de Giemsa de los frotis de sangre reveló presencia de cúmulos cocoides en el citoplasma de macrófagos, además de eritrocitos inmaduros. El agente rickettsial pudo ser aislado y titulado destie S. del Atlántico alcanzando un título de 10^6 TCID50 / g de tejido. Además se visualizó una fluorescencia (IFAT - U2) específica de las formas cocoides intra y extracelulares en niveles de 1500 a 10000 U2/100 CMD (Campos microscópicos). Los resultados permiten concluir que la especie salmonídea susceptible a la inoculación intraperitoneal de U2 (RLO) aislado de Puye (Galaxias maculatus) es el Salmón del Atlántico (Salmo salar)
Abstract:
The objective of the present work was to determine the susceptibility of Atlantic Salmon (Salmo salar), Coho Salmon (Oncorhynchm kisutch) and Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) to the intraperitoneal inoculation (i.p.) of the rickettsia like-organism named U2, orginally isolated from Puye fish (Galaxias maculatus) in the Llanquihue Lake. The sample material was 47 Atlantic Salmon, 47 Coho Salmon and 44 Rainbow Trouts. A control group contaiming 5 fish of each specie was also set up. All groups were kept in the Laboratory of Ictiopatology of the Universidad Austral de Chile. All fish were inoculated i.p. simultaneously, with 0.1 ml a puye isolated U2 at 10^2 TCID50/ fish, control group received only 0.1 ml i.p. of Culture Medium (MEM). The presence of the rickettsial agent was determined the by Koch’ Postulates. Clinical signs and associated mortality, was observed, only in Atlantic Salmon. The experimental group, Coho Salmon and Rainbow Trout were sampled daily taking 8-10 fish / day until the 30th day post inoculation. Control group was killed at the end of the study. The results obtained in this study showed that all Atlantic Salmon inoculated with the pathogen died.This allows to fulfill the Koch’s Postulate and confirmed that the isolated organism from puye fish was the cause of the disease. The clinical signology was characterized as haemorragic. The histopathology analysis of Salmo salar showed multifocal necrotic hepatitis, interstitial nephritis and tubular nephrosis, diffuse splenitis. Microscopically the imprintig of liver, spleen and kidney stained with Gram, showed intra a extracellular gram negative cocoid organism of 0.2 to 0.8 um in diameter. The Giemsa stain of blood smear revealed the presence of coccoid structures in the cytoplasm of macrophage cells and also juvenile eritrocytes. We were able to isolate a rickettsia like-organism (U2) from Atlantic Salmon at 10^6 TCID50/ g of tissue. The fluorescence test (IFAT / U2) specifically identified the intra and extracellular cocoid organisms at 1500 to 10000 U2/ 100 CMD (microscopic Fields). The results of this research allow us to conclude that the only salmonid species susceptible to the i.p. inoculation of U2, isolated of Puye (Galaxias maculatus), was Atlantic salmon (Salmo salar).
Palabras Clave:
salmón; infecciones por rickettsia
Editor:
Universidad Austral de Chile - Sistema de Bibliotecas - Programa Cybertesis
Formato:
text/pdf
Idioma:
es
Copyright:
Cárdenas Villarroel, Pedro Eduardo
Dirección Electrónica:
http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/1998/fvc266d/doc/fvc266d.pdf